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Revista Universidad de Guayaquil
Resumen
Los cultivos hortícolas son afectados por topatógenos de suelo que causan marchitez entre ellos el
hongo Sclerotium rolfsii, este topatógeno reduce los rendimientos y contribuye al aumento de los
costos de producción por efectos de control. Los objetivos fueron:1) Determinar la dosis de dos cepas
de Trichoderma asperellum sobre la severidad causada por Sclerotium rolfsii en los cultivos de to-
mate, pimiento y sandía en condiciones de invernadero, y 2) Evaluar la formas y épocas de aplicación
de dos cepas de T. asperellum en estos tres cultivos.
Los tratamientos del estudio de dosis fueron: 1) 5 millones de esporas por planta, 2) 10 millones, 3)
15 millones, 4) 20 millones, 5) 25 millones, 6) 30 millones de esporas por planta, 7) Suelo estéril,
8) Suelo sin esterilizar, 9) Suelo con Captan, 10) Semilla con Captapan.
El estudio de formas de aplicación tuvo 8 tratamientos: 1) Aplicado a la supercie del suelo, siete
días antes de la siembra, 2) Incorporación al suelo con materia orgánica y del antagonista siete días
antes de la siembra, 3) Aspersión al suelo del antagonista siete días antes de la siembra, 4) Aspersión
al suelo del antagonista siete días después de la siembra, 5) Suelo estéril, 6) Suelo sin esterilizar
(campo hortícola), 7) Suelo tratado con fungicida, 8) Suelo tratado con antagonista comercial. Los
dos experimentos se analizaron en un diseño completamente al azar con 10 unidades experimentales.
En el estudio de dosis se determinó que 1 x 206 de conidios de T. asperellum cepa G-08 en los culti-
vos de tomate, pimiento y sandia tienen efecto en la reducción de la severidad de la infección de S.
rolfsii; por otra parte, la cepa SE-034 con dosis de 15 gramos para los cultivos de tomate y pimiento;
en sandia 10 gramos de sustrato.
En la frecuencia de aplicación T. asperellum cepa G-08 para el cultivo de tomate, pimiento y sandía
debe aplicarse 7 días antes del trasplante en forma líquida e incorporada con materia orgánica para
tratamiento preventivo y con los primeros síntomas de la enfermedad en forma curativa, igual pro-
cedimiento debe realizarse con la con la cepa SE-034 .
“Control Biológico de Trichoderma asperellum
sobre Sclerotium rolfsii en condiciones de
invernadero”
Ing. Agr. Rolando Javier Capuz Eugenio - Ing. Agr. María Leticia Vivas Vivas
Evidence-based medicine. Chronic Chagas disease grave, with
ventricular aneurysm and their treatment
Revista de la Universidad de Guayaquil
Nº 109, Octubre - Diciembre 2010, pp. 22 - 28
ISSN 1019 - 6161
“Control Biológico de Trichoderma asperellum sobre Sclerotium rolfsii en condiciones de invernadero”
Revista Universidad de Guayaquil 23
Introducción
En Ecuador, los cultivos de tomate, pimiento y
sandía ocuparon en el 2006 alrededor de 7.445
ha. Distribuidas en su mayoría en unidades de
producción agrícola (UPA` s) menos de una hec-
tárea (SICA 2006). Estos cultivos se siembran en
ambientes favorables para algunas plagas como
insectos y topatógenos foliares y de suelo que
provocan pérdidas en rendimiento y aumento
en los costos de producción por efectos de con-
trol; tal es el caso que en la provincia de Manabí
los productores invierten alrededor del 50% del
costo de producción en plaguicidas (Carvajal,
1997).
Los topatógenos de suelo que incluyen hon-
gos y bacterias causan enfermedades conocidas
como marchitez, cuya incidencia puede provo-
car mortalidad de plantas hasta en un 80% du-
rante la etapa de oración e inicio de cosecha,
especialmente en monocultivo.
En los últimos 40 años el uso de productos quí-
micos en la agricultura ha aumentado llevando a
una dependencia de los mismos, lo cual ha origi-
nado daños en los sistemas agrícolas y ecosiste-
mas. Por otra parte, se ha generado resistencia
de los topatógenos a estos productos por lo
que causan resurgimientos y brotes secundarios
de las enfermedades (El Agro, 2005).
En la naturaleza existen microorganismos anta-
gonistas que actúan en forma natural sobre al-
gunos topatógenos, especialmente de suelo. El
control biológico de los patógenos es la destruc-
ción total o parcial de las poblaciones de estos
por medio de otros organismos (Agrios, 2004).
Por otra parte, Nicholls (2008) menciona que el
control biológico consiste en el uso de uno o más
organismos para reducir la densidad de una plan-
ta que causa daño al hombre. Así el control bio-
lógico puede denirse como uso de organismos
benécos (enemigos naturales) contra aquellos
que causan daño.
Estudios sobre la actividad biocontroladora en
vivo de la cepa A34 de Trichoderma harzianum
sobre Sclerotium rolfsii en tomate indicaron la
ecacia a partir de la ausencia de síntomas en
plantas tratadas (Reyes et al., 2002), igualmente
en Costa Rica se ha estudiado el efecto sobre
Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, S. cepivo-
rum, (Fernández - Larrea, 2001).
Por otra parte, los géneros Pseudomonas y Ba-
cillus son las bacterias más importantes debido
a su actividad antagonista. Pruebas in vitro con
estas dos bacterias aisladas en plátano y arroz
mostraron la capacidad de inhibir el crecimiento
de hongos topatógenos de suelo como Fusa-
rium oxysporum f. sp lycopersici, F. monilifor-
me y F. solani (Fernández-Larrea, 2001).
Los objetivos de esta investigación fueron: 1)
Evaluar seis dosis y dos cepas de Trichoderma as-
perellum sobre la severidad de Sclerotium rolfsii
en los cultivos de tomate, pimiento y sandía, y
2) Evaluar formas y épocas de aplicación de dos
cepas de T. asperellum en estos tres cultivos.
Materiales y métodos
Multiplicación de T. asperellum y Sclerotium
rolfsii en condiciones de laboratorio
Las cepas de T. asperellum G-08 (Provincia del
Guayas) y SE-034 (Provincia de Santa Elena) las
proporcionó el Departamento de Protección Ve-
getal de la Estación Experimental Litoral Sur
“Dr. Enrique Ampuero Pareja” del INIAP. Poste-
riormente se multiplicaron en medio de culti-
vo papa dextrosa agar (PDA) y en forma masiva
en arroz descascarillado y esterilizado; para el
propósito se colocó por cada 200 gramos de sus-
trato 5 ml de una solución de T. asperellum, se
dejó en incubación durante 7 días, luego se pro-
cedió a secar hasta un 14% de humedad, después
se almacenó en refrigeración para las pruebas
respectivas en invernadero. El topatógeno S.
rolfsii se multiplicó en PDA para inocular el suelo
estéril.
Dosis y frecuencias de aplicación de T. aspe-
rellum
Para este propósito se utilizaron fundas plásti-
cas con capacidad de 1.5 kg que contenían suelo
estéril, las mismas que se inocularon con el to-
patógeno S. rolfsii y siete días después se agre-
gó el antagonista en los 5 cm superciales del
suelo; posteriormente, se procedió a la siembra
de cada una de las plántulas de tomate hibrido
Heatwave, pimiento Quetzal y sandía Charleston
Grey. Se utilizaron 10 fundas por cada cultivo y
por cada tratamiento.
Las evaluaciones de severidad se realizaron se-
manalmente durante dos meses. Se utilizó la
escala 0 – 5 propuesta por CIAT para enferme-
dades de raíz y tallo; donde:0 = Sin síntomas
24 Revista Universidad de Guayaquil
INVESTIGACIÓN
visibles de la enfermedad; 1 = Decoloración li-
gera, ya sea sin lesiones necróticas o con un 10
% de los tejidos de las raíces y hojas cubiertos
con lesiones; 2 = Aproximadamente el 20 % de
los tejidos están cubiertos con lesiones, puede
observarse decoloración fuerte; 3 = Aproxima-
damente el 30 % de los tejidos están cubiertos
con lesiones, se combinan con ablandamiento y
pudrición; 4=Aproximadamente el 50 % de los te-
jidos están cubiertos con lesiones, se combinan
con ablandamiento y reducción considerable del
sistema radical.5 = Aproximadamente el 75 % o
más de los tejidos están afectados por estado
avanzado de pudrición, en combinación con la
reducción severa del sistema radical.
Este estudio constó de 6 dosis de T. asperellum
y cuatro testigos, lo que totalizó 10 tratamien-
tos: 1) 5 millones de esporas por planta, 2) 10
millones, 3) 15 millones, 4) 20 millones, 5) 25
millones, 6) 30 millones de esporas por planta,
7) Suelo estéril, 8) Suelo sin esterilizar, 9) Suelo
con Captan, 10) Semilla con Captapan.
Formas y épocas de aplicación
Las formas de aplicación fueron sólido (hongo
en arroz descascarado), líquido (hongo en agua)
e incorporado con materia orgánica (mazorca de
cacao). Para este estudio se utilizaron los cul-
tivos de tomate Floradade, pimiento Irazú largo
y sandía Charleston Grey. La severidad del to-
patógeno se evaluó semanalmente durante dos
meses y se utilizó la escala de CIAT descrita an-
teriormente.
Se investigó 8 épocas de aplicación: 1) Aplicado
a la supercie del suelo, siete días antes de la
siembra, 2) Incorporación al suelo con materia
orgánica y del antagonista siete días antes de
la siembra, 3) Aspersión al suelo del antagonista
siete días antes de la siembra, 4) Aspersión al
suelo del antagonista siete días después de la
siembra, 5) Suelo estéril, 6) Suelo sin esterilizar
(campo hortícola), 7) Suelo tratado con fungici-
da, 8) Suelo tratado con antagonista comercial.
El experimento se analizó en un diseño comple-
tamente al azar con 10 unidades experimenta-
les, para la comparación de las medias se utilizó
la prueba de rangos múltiples de Duncan p=0.05
Resultados y discusión
Efecto de dosis de T. asperellum sobre Sclero-
tium rolfsii
Ensayo de tomate
En la Figura 1 se muestran las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S.
rolfsii en plántulas de tomate. La cepa G-08 de
T. asperellum en dosis de 20 millones de esporas
por planta tuvo el menor valor de severidad con
0.15 %, y fue estadísticamente igual al testigo
químico (Captan) con 0% de severidad; las dosis
5, 10 y 15 millones de esporas por planta mostra-
ron los valores más altos con 2.02, 2.31 y 2.13%
de severidad respectivamente, e iguales estadís-
ticamente entre sí.
Con la cepa SE-034 la dosis de 10 millones de
esporas tuvo el menor porcentaje de severidad
(1.72), diferente estadísticamente, seguido del
tratamiento que consistía en suelo de campo
con 1.76%, lo que podría estar relacionado con
el efecto supresivo que tienen algunos suelos,
pues, resultan de la descomposición de materia-
les orgánicos (Hoitink y Pool, 1980). Los valores
más altos fueron en las dosis de 20, 30 millones
de esporas y el testigo químico Captapan con
2.16, 2.24 y 2.25% en su orden e iguales estadís-
ticamente.
Figura 1. Severidad causada por
S. rolfsii en plántulas de tomate
tratadas con T. asperellum en
función de dosis de aplicación.
EELS, INIAP, 2009.
“Control Biológico de Trichoderma asperellum sobre Sclerotium rolfsii en condiciones de invernadero”
Revista Universidad de Guayaquil 25
Ensayo de pimiento
En la Figura 2 se muestran las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S. rol-
fsii en plántulas de pimiento. La cepa G-08 de T.
asperellum en las dosis de 10, 25 y 30 millones de
esporas por planta y los tratamientos con suelo
esterilizado y Captapan tuvieron los valores más
bajos de severidad con 0 %, y fueron estadísti-
camente iguales entre sí; los valores más altos
fueron en las dosis 5 y 20 millones de esporas con
0.47% y 0.42% en su orden, seguido de Captan con
0.42% e iguales estadísticamente entre sí.
Con la cepa SE-034 la dosis 5 millones de espo-
ras tuvo el menor porcentaje de severidad con
0.10, diferente estadísticamente, seguido de la
dosis 15 millones, suelo esterilizado y suelo de
campo todos con 0.41% de severidad e iguales es-
tadísticamente entre sí, los porcentajes más altos
fueron en la dosis de 30 millones de esporas por
planta con 1.21, y fue estadísticamente diferente
de los demás.
Ensayo de sandía
En la Figura 3 se muestran las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S.
rolfsii en plántulas de sandía. El tratamiento de
menor severidad fue el suelo esterilizado con
0.04%, estadísticamente diferente de los demás
tratamientos. Todas las dosis de la cepa G-08 de
T. asperellum fueron iguales signicativamente
a los testigos.
Si bien los resultados con las dosis de T. aspe-
rellum cepa G-08 los porcentajes de severi-
dad uctuaron entre 1 y 2 de la escala, dichos
valores representan síntomas de decoloración y
aproximadamente un 20% de daño, sin embargo
fueron iguales a los testigos comerciales (Cap-
tan y Captapan) y suelo de campo, tratamiento
que podría utilizarse en el manejo de producción
ecológica para evitar el deterioro del agroeco-
sistema.
Con la cepa SE-034, los tratamientos Captapan
con 0.08% de severidad seguido de suelo de
campo con 0.65% y suelo esterilizado con 0.86%
fueron iguales estadísticamente .La dosis de 10
millones de esporas por planta de T. asperellum
cepa SE-034 tuvo el menor valor con 1.60% de
severidad, seguido de la dosis 30 millones de es-
poras con 1.91% , iguales estadísticamente.
Figura 2. Severidad causada por
S. rolfsii en plántulas de pimien-
to tratadas con T. asperellum en
función de dosis de aplicación.
EELS, INIAP, 2009.
Figura 3. Severidad causada por
S. rolfsii en plántulas de sandía
tratadas con T. asperellum en
función de dosis de aplicación.
EELS, INIAP, 2009.
26 Revista Universidad de Guayaquil
INVESTIGACIÓN
Ensayo de pimiento
En la Figura 5 se muestran las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S.
rolfsii en plántulas de pimiento. La cepa G-08
de T. asperellum aplicado en forma líquida 7
días antes de la siembra no tuvo presencia de
la enfermedad, igualmente en los tratamientos
suelo esterilizado, suelo de campo hortícola y
el testigo biológico comercial (GP); todos ellos
iguales estadísticamente entre sí ; los trata-
mientos en forma sólida 7 días antes de la siem-
bra e incorporada con materia orgánica, ambos
con 0.41% y el químico (Captan) con 0.33% de
infección e iguales estadísticamente.
Por otra parte, con la cepa SE-034 en los trata-
mientos en forma sólida incorporada con mate-
ria orgánica y líquida 7 días antes de la siembra
no hubo presencia de la enfermedad ; igualmen-
te en los tratamientos de suelo estéril, suelo de
campo hortícola, el químico(Captan), no se en-
contró signicancia. Igualmente los tratamien-
tos en forma sólida 7 días antes de la siembra
con 0.41% de severidad, líquido 7 días después
de la siembra, y el biológico comercial (GP), am-
bos 0.33%, fueron estadísticamente similares.
El efecto de la materia orgánica favorece la ac-
ción del antagonista, como lo ha demostrado el
trabajo de Hernández y Bustamante (2001) rea-
lizado en Costa Rica, para controlar la marchi-
tez ocasionada por Ralstonia solanacearum en la
que utilizaron enmiendas orgánicas como broza
de café, cachazas y tres tipos de compost mez-
cladas con suelo.
Formas y épocas de aplicación de T. asperellum
para el manejo de Sclerotium rolfsii
Ensayo de tomate
En la Figura 4 se observan las barras de los
promedios generales de severidad causada por
S. rolfsii en plántulas de tomate. Con la cepa
G-08 de T. asperellum aplicada en forma sólida
o líquida e incorporada con materia orgánica no
hubo presencia de la enfermedad, igualmente
en los demás tratamientos, excepto en forma lí-
quida 7 días después de la siembra y el químico
(Captan) ambos tuvieron 0.5% de infección. No
hubo signicancia en los tratamientos. Por otra
parte, con la cepa SE-034 en los tratamientos
en forma líquida 7 días después de la siembra
se observó 0.98% de severidad y fue estadística-
mente diferente a los otros tratamientos, segui-
do de la forma líquida 7 días antes de la siembra
con 0.41% y el tratamiento biológico comercial
con 0.05% de severidad, todos ellos diferentes
estadísticamente.
La respuesta positiva de T. asperellum sobre la
severidad causada por S. rolfsii en plántulas de
tomate se relaciona con los estudios de Sando-
val y López (2002), quienes mencionan que la
cepa A34 de Trichoderma harzianum reduce pa-
tógenos de suelos como Phytophthora parasítica,
Rhizoctonia solani y S. rolfsii.
Figura 4. Severidad causada por
S. rolfsii en plántulas de toma-
te tratadas con T. asperellum en
función de formas de aplicación.
EELS, INIAP, 2009.
“Control Biológico de Trichoderma asperellum sobre Sclerotium rolfsii en condiciones de invernadero”
Revista Universidad de Guayaquil 27
Figura 5. Severidad causada por
S. rolfsii en plántulas de pimien-
to tratadas con T. asperellum en
función de formas de aplicación.
EELS, INIAP, 2009.
Ensayos de sandía
En la Figura 6 se observan las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S.
rolfsii en plántulas de tomate. La cepa G-08 de
T. asperellum en forma líquida 7 días después
de la siembra, suelo de campo, Captan, GP y el
tratamiento sólido 7 días antes de la siembra
fueron iguales estadísticamente. En los cuatro
primeros tratamientos no hubo presencia de en-
fermedad; en el último, se encontró una severi-
dad de 0.06 %.
Con la cepa SE-034, los tratamientos con T. as-
perellum en forma líquida 7 días antes de la
siembra y el biológico comercial GP tuvieron
0.33% de severidad y fueron iguales estadística-
mente con los tratamientos suelo esterilizado,
Captan y suelo de campo hortícola. Con relación
a este último, podría relacionarse con el efecto
supresivo que tienen algunos suelos, resultado
de la descomposición de materiales orgánicos
(Hoitink y Pool, 1980).
Conclusiones
En pruebas de invernadero, Trichoderma cepa
G-08 en dosis de 20 g de sustrato conteniendo
1x206 esporas por gramo, reduce la severidad
causada por S. rolfsii en los cultivos de tomate,
pimiento y sandía.
Con la cepa SE-034 en dosis de 15 gramos de sus-
trato de Trichoderma reduce la severidad de S.
rolfsii para el cultivo de pimiento y tomate; en
el cultivo de sandía con 10 gramos de sustrato
que contiene 1x106 conidios/gramo.
Figura 6. Severidad causada por
S. rolfsii en plántulas de sandía
tratadas con T. asperellum en
función de formas de aplicación.
EELS, INIAP, 2009.
28 Revista Universidad de Guayaquil
INVESTIGACIÓN
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de_la_super%202006.htm
La forma de aplicar Trichoderma cepa G-08 so-
bre S. rolfsii en tomate debe realizarse 7 días
antes del trasplante, incorporada con materia
orgánica, con los primeros síntomas de la enfer-
medad. La cepa Trichoderma SE-034 para con-
trolar S. rolfsii en tomate se debe aplicar 7 días
antes del trasplante incorporado con materia
orgánica. En pimiento se recomienda aplicar 7
días antes de la siembra con materia orgánica o
en forma líquida. En sandía, esta tecnología se
debe realizar en forma líquida 7 días antes del
trasplante.
Recomendaciones
En base a los resultados obtenidos se recomien-
da:
• Efectuar estudios de dosis y frecuencia de
aplicación en condiciones de campo.
• Buscar alternativas de otros sustratos como
fuente de materia orgánica para la incorpo-
ración del antagonista contra los topatóge-
nos de suelo.
Ing. Agr. Rolando Javier Capuz Eugenio
Ing. Agr. Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad de Guayaquil, Becario del
Proyecto PIC-2006-1-013, INIAP.
Ing. Agr. María Leticia Vivas Vivas
Directora del proyecto: PIC-2006-1-013 “Alternativas biológicas para el manejo de
insectos plagas y topatógenos de suelo en cultivos hortícolas en las provincias de
Guayas y Manabí” ejecutado por INIAP. Profesora de la Facultad de Ciencias Agrarias de la
Universidad de Guayaquil y Directora de Tesis.
