“Control biológico
de trichoderma asperellum sobre sclerotium rolfsii en condiciones de
invernadero”
Evidence-based medicine.
Chronic chagas disease grave, with ventricular aneurysm and their treatment
Rolando Javier
Capuz Eugenio
María
Leticia Vivas Vivas
“Control biológico
de trichoderma asperellum sobre sclerotium rolfsii en condiciones de
invernadero”
Evidence-based medicine.
Chronic chagas disease grave, with ventricular aneurysm and their treatment
Rolando Javier
Capuz Eugenio1, María Leticia Vivas Vivas2
Como citar: Capuz Eugenio, R. J., & Vivas
Vivas, M. L. (2010). Control Biológico de Trichoderma asperellum sobre
Sclerotium rolfsii en condiciones de invernadero. Revista Universidad de Guayaquil. 109(4),
22–28. DOI: https://doi.org/10.53591/rug.v109i4.371
Resumen
Los cultivos hortícolas son afectados por fitopatógenos de suelo
que causan marchitez entre ellos el hongo
Sclerotium rolfsii, este fitopatógeno reduce los rendimientos y contribuye al
aumento de los costos de producción por efectos de control. Los objetivos fueron:1) Determinar la dosis de dos cepas de Trichoderma asperellum sobre la
severidad causada por Sclerotium rolfsii en
los cultivos de tomate, pimiento y sandía en condiciones de invernadero, y 2) Evaluar
la formas y épocas de aplicación de dos cepas de T. asperellum en estos tres cultivos.
Los tratamientos del estudio de dosis fueron: 1) 5 millones de
esporas por planta, 2) 10 millones, 3) 15 millones,
4) 20 millones, 5) 25 millones, 6) 30 millones de esporas por planta, 7) Suelo estéril,
8) Suelo sin esterilizar, 9) Suelo con Captan, 10) Semilla con Captapan.
El estudio de formas de aplicación tuvo 8 tratamientos: 1) Aplicado a la superficie del suelo,
siete días antes de la siembra, 2)
Incorporación al suelo con materia orgánica y del antagonista siete días antes de la siembra, 3) Aspersión al suelo del antagonista siete días antes de la siembra, 4) Aspersión al suelo del antagonista siete días
después de la siembra, 5) Suelo estéril, 6) Suelo sin esterilizar (campo hortícola), 7) Suelo tratado con
fungicida, 8) Suelo tratado con antagonista comercial. Los dos experimentos se analizaron en un diseño
completamente al azar con 10 unidades experimentales.
En el estudio de dosis se determinó que 1 x 206 de conidios de
T. asperellum cepa G-08 en los cultivos de tomate, pimiento y sandia tienen
efecto en la reducción de la severidad de la infección de S. rolfsii;
por otra parte,
la cepa SE-034 con dosis de 15 gramos para los cultivos
de tomate y pimiento; en sandia
10 gramos de sustrato.
En la frecuencia de aplicación T. asperellum cepa G-08 para el
cultivo de tomate, pimiento y sandía debe aplicarse
7 días antes del trasplante en forma líquida
e incorporada con materia orgánica
para tratamiento preventivo y
con los primeros síntomas de la enfermedad en forma curativa, igual
procedimiento debe realizarse con la con la cepa SE-034
.
Ingeniero
Agrónomo, Universidad de Guayaquil, Ecuador. Correo electrónico: revistaug@ug.edu.ec
Ingeniera
Agrónomo, Universidad de Guayaquil, Ecuador. Correo electrónico: revistaug@ug.edu.ec
Introducción
En
Ecuador, los cultivos de tomate,
pimiento y sandía ocuparon en el 2006
alrededor de 7.445 ha. Distribuidas
en su mayoría en unidades de producción agrícola (UPA` s) menos de una
hectárea (SICA 2006). Estos cultivos se siembran en ambientes favorables para algunas plagas como insectos y fitopatógenos foliares y de suelo que provocan pérdidas en rendimiento y aumento en los costos
de producción por efectos de con- trol; tal es el caso que en la provincia de Manabí los productores invierten alrededor del
50% del costo de producción en
plaguicidas (Carvajal, 1997).
Los
fitopatógenos de suelo que incluyen
hongos y bacterias causan enfermedades conocidas como marchitez, cuya
incidencia puede provo- car
mortalidad de plantas hasta en un 80% durante la etapa de floración e inicio de
cosecha, especialmente en monocultivo.
En
los últimos 40 años el uso de productos químicos en la agricultura ha aumentado llevando
a una dependencia de los mismos, lo cual ha originado
daños en los sistemas agrícolas y ecosistemas. Por otra parte, se ha generado
resistencia de los fitopatógenos a
estos productos por lo que causan resurgimientos y brotes secundarios de las enfermedades (El Agro, 2005).
En
la naturaleza existen microorganismos anta- gonistas
que actúan en forma natural sobre algunos fitopatógenos, especialmente de
suelo. El control biológico de los
patógenos es la destrucción total o parcial de las poblaciones de estos por medio de otros organismos (Agrios, 2004).
Por
otra parte, Nicholls (2008) menciona que el control biológico
consiste en el uso de uno o más organismos para reducir la densidad de una planta
que causa daño al hombre. Así el control biológico puede definirse como
uso de organismos benéficos (enemigos
naturales) contra aquellos que causan
daño.
Estudios
sobre la actividad biocontroladora en vivo
de la cepa A34 de Trichoderma harzianum sobre
Sclerotium rolfsii en tomate indicaron la eficacia
a partir de la ausencia de síntomas en plantas
tratadas (Reyes et al., 2002), igualmente en Costa Rica se ha estudiado el efecto sobre Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, S.
cepivorum, (Fernández - Larrea, 2001).
Por otra parte, los
géneros Pseudomonas y Bacillus son las bacterias más importantes debido a
su actividad antagonista. Pruebas in vitro con
estas dos bacterias aisladas en plátano y arroz mostraron la capacidad
de inhibir el crecimiento de hongos fitopatógenos de suelo como Fusarium oxysporum f. sp lycopersici, F. monilifor- me y F. solani (Fernández-Larrea, 2001).
Los objetivos de esta investigación fueron: 1)
Evaluar seis dosis y dos cepas de Trichoderma asperellum sobre la severidad
de Sclerotium rolfsii
en los cultivos de tomate, pimiento y sandía, y
2)
Evaluar formas y épocas de aplicación de dos
cepas de T. asperellum en estos tres cultivos.
Materiales y métodos
Multiplicación de T. asperellum y
Sclerotium rolfsii en condiciones de laboratorio
Las
cepas de T. asperellum G-08 (Provincia del Guayas)
y SE-034 (Provincia de Santa Elena) las proporcionó el Departamento de Protección
Vegetal de la Estación Experimental Litoral Sur “Dr. Enrique Ampuero Pareja” del INIAP. Posteriormente se multiplicaron en medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA) y en forma masiva en arroz descascarillado y esterilizado;
para el propósito se colocó por cada
200 gramos de sus- trato 5 ml de una
solución de T. asperellum, se dejó en
incubación durante 7 días, luego se pro- cedió a secar hasta
un 14% de humedad, después
se almacenó en refrigeración para las pruebas respectivas en invernadero. El fitopatógeno S. rolfsii se multiplicó en PDA para inocular el suelo estéril.
Dosis y frecuencias
de aplicación de T. asperellum
Para
este propósito se utilizaron fundas
plásticas con capacidad de 1.5 kg que contenían suelo
estéril, las mismas
que se inocularon con el fitopatógeno S. rolfsii y siete días después se agregó
el antagonista en los 5 cm superficiales del
suelo; posteriormente, se procedió a la siembra de cada una de las plántulas de tomate hibrido Heatwave,
pimiento Quetzal y sandía Charleston Grey. Se utilizaron 10 fundas por cada cultivo y por cada tratamiento.
Las
evaluaciones de severidad se realizaron se- manalmente
durante dos meses. Se utilizó la escala
0 – 5 propuesta por CIAT para enferme- dades de raíz y tallo;
donde:0 = Sin síntomas
visibles
de la enfermedad; 1 = Decoloración
ligera, ya sea sin lesiones
necróticas o con un 10
%
de los tejidos de las raíces y hojas
cubiertos con lesiones; 2 =
Aproximadamente el 20 % de los
tejidos están cubiertos con lesiones, puede observarse
decoloración fuerte; 3 = Aproximadamente
el 30 % de los tejidos están cubiertos con lesiones, se combinan con
ablandamiento y pudrición; 4=Aproximadamente el 50 % de los tejidos
están cubiertos con lesiones, se
combinan con ablandamiento y reducción considerable del sistema radical.5 = Aproximadamente el 75
% o más de los tejidos están afectados por estado avanzado de pudrición, en combinación con
la reducción severa del sistema
radical.
Este
estudio constó de 6 dosis de T. asperellum y
cuatro testigos, lo que totalizó 10
tratamientos: 1) 5 millones de esporas por planta, 2) 10
millones,
3) 15 millones, 4) 20 millones, 5) 25 millones,
6) 30 millones de esporas por planta,
7)
Suelo estéril, 8) Suelo sin esterilizar, 9) Suelo con Captan, 10) Semilla con Captapan.
Formas y épocas
de aplicación
Las
formas de aplicación fueron sólido
(hongo en arroz descascarado),
líquido (hongo en agua) e incorporado con materia orgánica
(mazorca de cacao). Para este estudio se utilizaron los cultivos de tomate Floradade, pimiento
Irazú largo y sandía Charleston
Grey. La severidad del fitopatógeno se evaluó semanalmente durante dos meses y se utilizó la escala de CIAT
descrita anteriormente.
Se investigó 8 épocas de aplicación: 1) Aplicado a la superficie del suelo, siete días
antes de la siembra, 2) Incorporación
al suelo con materia orgánica y del antagonista siete días antes de la siembra, 3) Aspersión al suelo del antagonista siete
días antes de la siembra,
4) Aspersión al
suelo del antagonista siete
días después de la siembra, 5) Suelo estéril, 6) Suelo sin esterilizar (campo
hortícola), 7) Suelo tratado con fungicida,
8) Suelo tratado con antagonista comercial. El
experimento se analizó en un diseño completamente al azar con 10 unidades
experimenta- les, para la comparación de las medias
se utilizó la prueba de rangos múltiples
de Duncan p=0.05
Resultados y discusión
Efecto de dosis de T. asperellum sobre Sclerotium rolfsii
Ensayo de tomate
En
la Figura 1 se muestran las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S. rolfsii en plántulas de
tomate. La cepa G-08 de
T. asperellum en dosis de 20 millones
de esporas por planta tuvo el menor valor de severidad con
0.15
%, y fue estadísticamente igual al testigo químico
(Captan) con 0% de severidad; las dosis 5, 10 y 15 millones de esporas por planta mostraron los valores más altos con 2.02,
2.31 y 2.13% de severidad
respectivamente, e iguales
estadísticamente entre sí.
Con
la cepa SE-034 la dosis de 10
millones de esporas tuvo el menor
porcentaje de severidad (1.72),
diferente estadísticamente, seguido del tratamiento
que consistía en suelo de campo con
1.76%, lo que podría estar relacionado con el
efecto supresivo que tienen algunos suelos, pues, resultan
de la descomposición de materia-
les orgánicos (Hoitink y Pool, 1980). Los valores más altos fueron en las dosis de 20, 30 millones de esporas y el testigo químico Captapan con 2.16, 2.24 y 2.25% en su orden e iguales
estadísticamente.
Ensayo de pimiento
En
la Figura 2 se muestran las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S. rolfsii en plántulas de pimiento. La cepa G-08 de T. asperellum en las dosis de 10, 25 y 30 millones de esporas
por planta y los tratamientos con suelo esterilizado
y Captapan tuvieron los valores más bajos
de severidad con 0 %, y fueron
estadísticamente iguales entre sí; los valores más altos fueron en las dosis 5 y 20 millones de esporas con 0.47% y 0.42% en su orden, seguido
de Captan con 0.42%
e iguales estadísticamente entre sí.
Con
la cepa SE-034 la dosis 5 millones de esporas tuvo el menor porcentaje de
severidad con 0.10, diferente
estadísticamente, seguido de la dosis
15 millones, suelo esterilizado y suelo de campo todos con 0.41% de severidad
e iguales estadísticamente entre sí, los porcentajes más altos fueron en la dosis de 30 millones de
esporas por planta con 1.21, y fue estadísticamente diferente de los demás.
Ensayo de sandía
En
la Figura 3 se muestran las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S. rolfsii en plántulas de sandía. El tratamiento de menor severidad fue el suelo esterilizado
con 0.04%, estadísticamente diferente
de los demás tratamientos. Todas las dosis de la cepa G-08 de
T.
asperellum fueron iguales significativamente
a los testigos.
Si
bien los resultados con las dosis de T. asperellum cepa G-08 los porcentajes de
severidad fluctuaron entre 1 y 2 de la escala, dichos valores representan síntomas de
decoloración y aproximadamente un 20% de daño, sin embargo
fueron
iguales a los testigos comerciales (Captan y Captapan) y suelo de campo, tratamiento que podría utilizarse en el manejo
de producción ecológica para evitar el deterioro del
agroecosistema.
Con
la cepa SE-034, los tratamientos Captapan con 0.08% de severidad
seguido de suelo de campo con 0.65% y suelo esterilizado con
0.86% fueron iguales estadísticamente
.La dosis de 10 millones de esporas por planta de T.
asperellum cepa SE-034 tuvo el menor
valor con 1.60% de severidad, seguido
de la dosis 30 millones
de esporas con 1.91% , iguales estadísticamente.
Formas y épocas de aplicación de T. asperellum para el manejo de Sclerotium rolfsii
Ensayo de tomate
En
la Figura 4 se observan las barras de los promedios generales
de severidad causada
por
S.
rolfsii en plántulas de tomate. Con la cepa G-08 de T. asperellum aplicada en forma sólida o líquida e incorporada con materia
orgánica no hubo presencia de la
enfermedad, igualmente en los demás tratamientos, excepto en forma líquida
7 días después de la siembra y el químico (Captan)
ambos tuvieron 0.5% de infección. No hubo
significancia en los tratamientos. Por otra parte, con la cepa SE-034 en los tratamientos
en
forma líquida 7 días después de la
siembra se observó 0.98% de severidad
y fue estadística- mente diferente a
los otros tratamientos, segui- do de la forma
líquida 7 días antes de la siembra
con 0.41% y el tratamiento biológico comercial con 0.05% de severidad, todos ellos diferentes estadísticamente.
La
respuesta positiva de T. asperellum sobre la
severidad causada por S.
rolfsii en plántulas de tomate se relaciona con los estudios de Sandoval y López (2002), quienes mencionan que la cepa A34 de Trichoderma harzianum
reduce patógenos de suelos como Phytophthora parasítica, Rhizoctonia solani y S. rolfsii.
Ensayo de pimiento
En
la Figura 5 se muestran las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S. rolfsii en plántulas de pimiento. La cepa G-08
de T. asperellum aplicado en forma líquida
7 días antes de la siembra no tuvo presencia de la enfermedad,
igualmente en los tratamientos suelo esterilizado, suelo de campo hortícola y el
testigo biológico comercial (GP); todos ellos
iguales estadísticamente entre sí ; los
trata- mientos en forma sólida 7 días
antes de la siembra e incorporada con materia orgánica, ambos con 0.41%
y el químico (Captan) con 0.33%
de infección e iguales estadísticamente.
Por
otra parte, con la cepa SE-034 en los tratamientos en forma sólida incorporada con materia orgánica y líquida 7 días antes de la siembra
no hubo presencia de la enfermedad ; igualmente en los
tratamientos de suelo estéril, suelo de campo
hortícola, el químico(Captan), no se encontró significancia. Igualmente los tratamientos en forma sólida 7 días antes
de la siembra con 0.41% de severidad,
líquido 7 días después de la siembra, y el biológico comercial (GP), ambos
0.33%, fueron estadísticamente similares.
El
efecto de la materia orgánica favorece la acción del antagonista, como lo ha
demostrado el trabajo de Hernández y
Bustamante (2001) realizado en Costa Rica, para controlar la marchitez ocasionada por Ralstonia solanacearum en la que
utilizaron enmiendas orgánicas como broza de
café, cachazas y tres tipos de compost mezcladas con suelo.
Ensayos de sandía
En
la Figura 6 se observan las barras de los pro-
medios generales de severidad causada por S. rolfsii en plántulas de
tomate. La cepa G-08 de
T.
asperellum en forma líquida 7 días después de
la siembra, suelo de campo, Captan, GP y el tratamiento
sólido 7 días antes de la siembra fueron
iguales estadísticamente. En los cuatro primeros
tratamientos no hubo presencia de enfermedad; en el último, se encontró una
severidad de 0.06 %.
Con
la cepa SE-034, los tratamientos con T.
as- perellum en forma líquida 7 días antes de la siembra y el biológico comercial GP tuvieron 0.33% de
severidad y fueron iguales estadística- mente
con los tratamientos suelo esterilizado, Captan y suelo de campo hortícola. Con relación a este último, podría relacionarse con
el efecto supresivo que tienen
algunos suelos, resultado de la
descomposición de materiales orgánicos (Hoitink y Pool,
1980).
Conclusiones
En
pruebas de invernadero, Trichoderma cepa G-08
en dosis de 20 g de sustrato conteniendo 1x206
esporas por gramo, reduce la severidad causada
por S. rolfsii en los cultivos de tomate, pimiento y sandía.
Con la cepa SE-034 en dosis de 15 gramos de sus- trato de Trichoderma reduce la severidad
de S. rolfsii para el cultivo de pimiento y tomate; en el cultivo de sandía
con 10 gramos de sustrato que contiene
1x106 conidios/gramo.
La forma de aplicar Trichoderma cepa G-08 sobre S. rolfsii en tomate
debe realizarse 7 días antes del
trasplante, incorporada con materia orgánica, con los primeros síntomas de la
enfermedad. La cepa Trichoderma SE-034 para controlar S. rolfsii en tomate se
debe aplicar 7 días antes del
trasplante incorporado con materia orgánica.
En pimiento se recomienda aplicar 7 días
antes de la siembra con materia orgánica o en
forma líquida. En sandía, esta
tecnología se debe realizar en forma líquida 7 días antes del trasplante.
Recomendaciones
En base a los resultados obtenidos
se recomienda:
• Efectuar estudios de
dosis y frecuencia de aplicación en condiciones de campo.
• Buscar alternativas de otros sustratos como fuente de materia orgánica para la
incorporación del antagonista contra los fitopatógenos de suelo.
Bibliografía
Agrios, G. 2004. Fitopatología. Editorial Limusa S.A. México. p.192-
515
Carvajal, T. 1997. En Manual de Cultivos Hortícolas. (Estación
Experimental Portoviejo). p. 5
Daxl Rainer.
1994. El Manejo
Integrado de Plagas.
Rossdorf- Alemania. p.25
EL AGRO. 2004. Revista Edición No.
107 Editorial Uminasa S.A. Guayaquil Ecuador. p.17
EL AGRO. 2005. Revista Edición No.
111 Editorial Uminasa S.A. Guayaquil Ecuador. p.51
Fernández-Larrea.O. 2001.
Manejo Integrado de Plagas, Avances en el Fomento de Productos Fitosanitarios no Sintéticos,
Microorganismos Antagonistas para el Control Fitosanitario, Costa Rica, No. 62 p.96-100.
Hernández L. y Bustamante E. 2001. Control biológico de la marchitez
bacterial en tomate con el uso de enmiendas orgánicas. En Manejo Integrado de Plagas, Costa
Roca, No. 62 p 18 - 28
Hoitink, H. y Pool, HA. 1980. Factors affecting quality of compost for utilization in
container media. Horticultural Science
15:171-173
Nicholls, C. 2008. Control biológico de insectos: un enfoque agroecológico. Antioquia Colombia.
p.1.
Sandoval, I., Lopez, M., Bonilla, T. y Oliva, O. 2002. Estudios del biocontrol-- de hongos
del suelo con Trichoderma harzianum
y la combinación de la solarización en el clavel (Dianthus barbatus). En XII Congreso Científico Instituto
Nacional de Ciencias Agrícolas. La Habana Cuba. Nov. 12 al 15 de 2002,
p.141.
Reyes, T., Rodriguez, G., Pupo, A., Alarcon, L., Limonta, Y. 2002. Efectividad in vitro de Trichoderma harzianum para el biocontrol
de Rhizoctonia solani Kuhn y
Pyricularia grisea sacc. aislados en el cultivo
del arroz (Oryza
sativa L.). Disponible en: www.inisav.cu/fitosanidad/
SICA.2006 Disponible en: http: //www.sica.gov.ec/agro/docs/CUADRO3%20ecuador_estimación_ de_la_superfi%202006.htm
Ing. Agr. Rolando Javier
Capuz Eugenio
Ing. Agr. Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad de
Guayaquil, Becario del Proyecto PIC-2006-1-013, INIAP.
Ing. Agr. María Leticia Vivas Vivas
Directora del proyecto:
PIC-2006-1-013 “Alternativas biológicas para el manejo de insectos plagas y fitopatógenos de suelo en cultivos hortícolas en las
provincias de Guayas y Manabí”
ejecutado por INIAP. Profesora de la Facultad de Ciencias Agrarias de la
Universidad de Guayaquil y directora de Tesis.
