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Efecto de reguladores de crecimiento para la propagación vegetativa
de guayusa (Ilex guayusa L.)
Effect of growth regulators on vegetative propagation
of guayusa (Ilex guayusa L.)
Carmen Emelia Muñoz López1, Lisseth Mishel García García2, Reina Concepción Medina Litardo3,
Leticia Vivas Vivas4
1MSc, Universidad de Guayaquil. Facultad de Ciencias Agrarias, Ecuador.
2Ing. Agr. Asesor Técnico Independiente, Quinindé, Esmeraldas, Ecuador
3 MSc, Universidad de Guayaquil. Facultad de Ciencias Agrarias.
4 MSc, Universidad de Guayaquil. Facultad de Ciencias Agrarias.
Autor para correspondencia: carmen.munozl@ug.edu.ec
Recibido: 12 agosto 2022
Aprobado: 24 noviembre 2022
Publicado: 12 diciembre 2022
Resumen
El estudio se realizó en la provincia Esmeraldas,
cantón Quinindé en el recinto el Limón, se evaluó el
efecto de reguladores de crecimiento para la
propagación vegetativa de guayusa (Ilex guayusa L.).
Se estudiaron 3 tratamientos (Auxinas): tratamiento 1:
ANA ácido naftanelacético (2,75 mg/l), tratamiento 2:
ANA ácido naftanelacetico (5,50 mg/l) y tratamiento
3: aib ácido indolbutírico (10,00 mg/ha) generando 7
repeticiones, se utilizó el diseño completamente al
azar, con 5% de probabilidad de la prueba de Duncan.
De acuerdo con los resultados obtenidos en la presente
investigación se concluye lo siguiente: T1: ANA-
ácido naftalenacético en dosis de (2,75 mg/l) y T2:
ANA Ácido Naftanelacético en dosis (5,50 mg/l)
presentaron un promedio de 85% ambas con raíces,
T3: AIB-Ácido Indolbutírico dosis (10,00 mg/l ) con
72%; T1: ANA- ácido naftalenacético en dosis de
(2,75 mg/l) reportó el mayor volumen de raíz y
longitud con un promedio de (4,2 mg/l) y (7,76 mm)
respectivamente.
Palabras claves: Reguladores, crecimientos,
acodos aéreos, ácido naftanelacético, ácido
indolbutíirico.
Abstract
The study was carried out in the province of
Esmeraldas, Canton Quinindé in the El Limón
enclosure, the effect of growth regulators for the
vegetative propagation of guayusa (Ilex guayusa) was
evaluated. We studied 3 treatments (Auxins): ANA
(2.75 and 5.50mg/l) and AIB (10.00 mg/ha) generating
3 treatments with 7 repetitions, the design was used
completely randomly, with 5% of probability of the
Duncan test (Analysis of variance). ). According to the
results obtained in the present research, the following
is concluded: Naphthaleneacetic acid at doses of 2.75
mg / l and 5.50% presented an average of 85% both,
Indolbutyric acid with 72%; Naphthaleneacetic acid at
doses of 2.75 mg/l reported the highest root volume
and length with an average of 4.2 mg/l and 7.76 mm
respectively.
Key words: Regulators, growth, air layering,
naphthaleneacetic acid, indolebutyric acid
Introducción
Ecuador es considerado es un país diverso donde se
encuentra varias especies forestales alrededor de 600
que tienen una buena diversidad morfológica que
incluyen arbustos, arboles perennifolios y árboles
deciduos de gran importancia económica que son
altamente aprovechadas, lo cual podría ser de gran
valor para poder engrandecer los mercados, que
permitan conocer sus propiedades que favorecerán a
los consumidores (Crespo, 2018). Según Radice &
Vidari (2007), la amazonia ecuatoriana presenta una
de las áreas con mayor biodiversidad del planeta y por
su enorme variedad de plantas se convierte en una
fuente de investigación de interés permanente,
especialmente para el desarrollo de materias primas
del mercado.
La guayusa (Ilex guayusa L.) de la familia
Aquifoliaceae es considerada una planta nativa de la
amazonia ecuatoriana consumida por comunidades
indígenas desde hace 1000 años, se la encuentra en las
provincias de Morona Santiago, Pastaza, Napo,
Sucumbíos, Zamora Chinchipe (Radice & Vidari,
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2007). El árbol de guayusa se la utilizó hace muchos
años en muchas generaciones, debido a que los
indígenas practicaban rituales, aprovechando sus
propiedades medicinales que los ayudaban a mantener
un nivel de energía, huesos fuertes, mejoramiento de
problemas de gastritis, fertilidad en las mujeres,
antioxidantes; pero, al consumir en exceso estas
bebidas energéticas pueden ser perjudiciales para la
salud, contiene estimulantes y poderoso energizante
que ayudan a disminuir el cansancio, presión arterial y
fatiga, por eso, la necesidad de investigar esta planta,
sus usos y expendio en el mercado que además genera
fuentes de empleo local. En la provincia de Morona
Santiago es identificada por el nombre de shuar wais,
en la actualidad, los shuars amazónicos son pueblos
que aún siguen con el uso de esta planta, pero ahora
han perdido el interés de seguir las tradiciones debido
a que solo las comunidades más cercanas a la selva son
los que aprovechan la guayusa para continuar con sus
rituales como lo han realizado sus generaciones
pasadas (Crespo, 2018).
Para la multiplicación asexual de plantas de guayusa,
se realizan acodos aéreos, que consiste, que de la rama
del arbusto broten nuevas raíces, En las propiedades
fitoquímicas la parte importante del cultivo son las
hojas, ya que son utilizadas para la elaboración de
bebidas con propiedades estimulantes. Arias y Gualli
(2013), mencionan que la guayusa contiene alcaloides,
flavonoides, fenoles-taninos, saponinas y ciertos
aminoácidos como teobromina, L-teanina, esenciales
para el ser humano y una alta actividad antioxidante
(Crespo, 2018), compuestos esenciales para el
consumo humano por su alta actividad antioxidante.
Al ser un cultivo de guayusa nuevo entre los
productores, todavía existe incertidumbre sobre el
manejo en lo que se refiere a la clonación masiva de
plantas, por lo que se necesita continuar en procesos
de capacitación y buscando alternativas con
tecnologías de avanzada y solventar esta falencia ya
que hoy se cuenta con técnicas como el uso de
fitohormonas para clonar plantas a partir de acodos
aéreos, pero existe la necesidad de conocer un
protocolo para que estos explantes se elonguen
caulinar y radicularmente y luego sean separados de la
planta madre y colocar en fundas con un sustrato
adecuado, los bosques están sufriendo un proceso de
disminución de sus poblaciones debido a factores
antropogénicos como tala y quema, así como la
extracción de minerales, alterando su hábitat natural
(Ramírez et al., 2020).
La comercialización de I. guayusa se ha incrementado
en la región amazónica de Ecuador. La Fundación
RUNA es una de las principales empresas dedicadas
al procesamiento de la hoja para diversos usos (té y
bebidas energizantes) desde el 2009. Las comunidades
que cultivan guayusa están aprendiendo a valorar esta
especie como una fuente de ingresos económicos y por
lo tanto ampliando el área de cultivo. Se han realizado
varios estudios que han reportado propiedades
fitoquímicas en las hojas, como la presencia de
metilxantinas, entre otros. Ante este panorama, y
debido a las limitaciones que tiene el cultivo
tradicional de I. guayusa., es importante encontrar
formas alternativas de propagación de esta especie. Al
tener restricciones con la germinación de semillas, la
siembra depende exclusivamente de formas de
propagación vegetativa, lo cual eventualmente podría
conducir a una reducción de su diversidad genética y
llevarla a una condición de vulnerabilidad. Desde el
punto de vista ecológico, el cultivo y mantenimiento
in vitro de guayusa podría constituir una forma de
conservación ex situ de esta especie. Por estas razones,
este estudio representa un primer acercamiento para
establecer protocolos de cultivo in vitro de guayusa
por medio de la propagación de segmentos nodales
(reproducción de partes vegetales.). Por lo antes
expuesto la investigación tuvo como objetivo,
determinar el efecto de reguladores de crecimiento
para la propagación vegetativa de guayusa mediante
acodos aéreos.
Materiales y métodos
El trabajo experimental se llevó acabo, en el recinto el
Limón, parroquia la Unión del Cantón Quinindé,
provincia de Esmeraldas, Ecuador; con una altitud de
131 a 141 msnm, una temperatura media anual 24 a
26ºC, humedad relativa de 85% y precipitación media
anual de 905 mm.
Según la clasificación de Holdridge, el lote
experimental pertenece al tipo de Trópico Seco, este
terreno presenta topografía plana y regular, posee una
textura limo-arcilloso y pedregosos con rocas a menos
de 20 cm, con un pH > 7 (Bernal, 2019).
Tratamientos:
T1= Concentración 2,75 mg/l de Ácido
Naftaneáleacetico.
T2= Concentración 5,50 mg/l de Ácido
Naftaneáleacetico.
T3= Concentración 10.00 mg/l de Ácido Indolbutírico.
Se utilizó un diseño completamente al azar, con siete
repeticiones; la comparación de medias de los
tratamientos se estableció mediante la prueba de
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Duncan al 5% de probabilidad estadística, para el
análisis de los datos se utilizó el cálculo de coeficiente
y se expresó en porcentaje.
Manejo del experimento
Propagación vegetativa por acodos aéreos. Primero se
seleccionaron las ramas que estuvieron en buen estado
vegetativo guayusa para realizarse a cabo este método
de estudio. Se escogieron ramas jóvenes menores de
un año, color verdosas de diámetro de 1 a 2 cm.
Acodadura aérea en plantas seleccionadas
Para realizar este experimento, se hicieron 21
acodaduras, en 3 árboles de guayusa, donde se utilizó
el bisturí esterilizado longitud de la hoja 42 mm,
usando guantes de cirugía y realizando un corte
circular aproximadamente 2 cm de ancho en ramas
seleccionadas para el acodo. Este proceso se llevó a
cabo en ramas fuertes de tamaño de 1 a 2 cm de
diámetro, donde se procedió a retirar la corteza
(epidermis) sin lastimar su xilema, haciendo esto en
todas las ramas seleccionadas, usando previamente
alcohol como desinfectante.
Preparación de hormonas
En el laboratorio se procedió a diluir las fitohormonas
para enraizamiento ANA-Ácido naftaleneácetico y
AIB- Ácido indolbutírico cada uno en concentraciones
de 200 ppm; 500 ppm; 1000 ppm 2,75; 5,5; 10 ppm,
con alcohol etílico al 75% diluido en dosis de 5 ml para
completarlo al 100% la dilución, se añadió 40% de
agua destilada estéril y obtener una interacción de 1 a
1. Estas dosis fueron aplicadas en cada acodo aéreo
con sus respectivos tratamientos y donde se evaluó su
formación de callos y desarrollo de raíces.
Incisión para realizar el acodo
Se retiró con el bisturí esterilizado la epidermis o
corteza donde se realizó la acodadura, luego se
procedió a colocar el papel absorbente humedecido
con las dosis ya determinadas de cada una de las
auxinas, ANA Y AIB; y, una vez que se concentren en
la xilema, aparecerá una capa de parénquimas (callos)
y por ultimo las células vasculares y floema.
Preparación del sustrato
El sustrato utilizado fue humus de lombriz, mantillo
de huerta, tamo de arroz, tierra y hojas. Previamente
esterilizado. Se lo mezcló y se regó con agua hasta que
quede con la humedad deseada para los acodos aéreos.
Luego se cubrió la incisión con el sustrato preparado
con una cantidad pequeña de 111 g de sustrato. Para
que los acodos queden firmes, se los cubrió con una
cinta pegante adecuada para que la incisión y el
sustrato queden compactos y cumplan su función.
Se lo realizó con una jeringuilla de 60 ml donde se le
aplicaron por cada acodo aéreo una o dos jeringuillas
del volumen ya descrito, la cantidad precisa para
mantener húmedo el sustrato que esté en su capacidad
de campo. El riego se hizo 1 a 2 veces por semana
dependiendo del tipo de clima.
Variables evaluadas
Número de raíces a los (60 días). El conteo de esta
variable se hizo entre los dos meses, mientras duró el
experimento.
Longitud de las raíces a los 90 días. Estas variables se
evaluaron a los 90 días ya establecidos los
tratamientos, las medidas se la tomaron en centímetros
y se utilizó una regla milimétrica o calibrador vernier
electrónico.
Volumen de raíces a los 90 días. En esta variable se
utilizó una probeta para sacar el volumen, es decir, la
diferencia entre volumen de raíces.
Porcentaje de acodos enraizados. Esta variable se
realizó a los 60 días, donde se contabilizó el número
de acodos enraizados en cada parcela experimental
para luego ser transformado en porcentaje.
Resultados y discusión
Número de raíces
De acuerdo al análisis de varianza, el promedio
general es de 24 raíces con un coeficiente de variación
de 20,83%.
El tratamiento 2 (Ácido Naftalenacético en dosis de
5,50 mg/l), presentó el mayor número de raíz con un
promedio de 36 raíces, igual estadísticamente al
tratamiento 1 (Ácido Naftalenacético en dosis de 2,75
mg/l) con un promedio de 28 raíces, difieren
estadisticamente del tratamiento 3 (Ácido
Indolbutírico en dosis de 10,00 mg/l) quien reportó el
menor número de raíces con un promedio de 9 raíces
(Tabla 1). Resultado que concuerda con Hartmann y
Kester (2017), quienes expresan que la hormona ANA
presenta un efecto sobre el número de raíz en dosis de
5,00 mg/l.
Tabla 1. Promedios de número de raíz mediante la
aplicación de reguladores de crecimiento para la
propagación vegetativa de guayusa
Nº
Promedios
Nú
mer
o d
e
ra
íz
1
28a**1
2
36ª
3
9b
P
r
o
me
dio
24
C.V.(
%
)
20,83
1Valor(es) señalado(s) con la(s) misma(s) letra(s)
no difieren estadísticamente entre sí(Duncan α
0,05); N.S. No Significativo.** Significancia al 5%.
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Longitud d
e
ra
íz
El coeficiente de variación es de 25,58% y un
promedio general de 6,16 mm (Tabla 2).
El tratamiento 1 (Ácido Naftalenacético en dosis de
2,75 mg/l) alcanzó el mayor promedio de longitud de
la raíz con 7,76 mm, igual estadísticamente al
tratamiento 2 (Ácido Naftalenacético en dosis de 5,50
mg/l) con un promedio de 6,31 mm difiere
estadísticamente del tratamiento 3 (Ácido
Indolbutírico en dosis de 10,00 mg/l) con un promedio
de 4,41 mm (Tabla 2). Resultados similares con lo
expresado por Ramírez et al. (2020), quien en su
experimento mediante la aplicación de diferentes dosis
de ANA y AIB, siendo la dosis de 2,5 la más rentable
de los tratamientos con un valor de 7,2 a dosis 6,00
mg/l.
Tabla 2. Promedios de longitud de raíz mediante la
aplicación de reguladores de crecimiento para la
propagación vegetativa de guayusa
Nº
Tratamientos
Promedios
Longitud de
raíz (mm)
1
Ácido Naftalenacético (2,75 mg/l)
7,76 a**1
2
Ácido Naftalenacético (5,50 mg/l)
6,31 a
3
Ácido Indolbutírico (10,00 mg/l)
4,41 b
Promedio
6,16
C.V.(%)
25,58
1Valor(es) señalado(s) con la(s) misma(s) letra(s)
no difieren estadísticamente entre sí (Duncan α
0,05); N.S. No Significativo.** Significancia al 5%.
Volumen de raíz
El coeficiente de variación fue de 22,25% y el
promedio general de 3,12 mg/l (Tabla 3).
El tratamiento 1 (Ácido Naftalenacético en dosis de
2,75 mg/l) reportó el mayor volumen de raíz con un
promedio de 4,2 mg/l, igual estadísticamente al
tratamiento 2 (Ácido Naftalenacético en dosis de 5,50
mg/l)con un promedio de 3,02 mg/l, difieren
estadísticamente del tratamiento 3 (Ácido
Indolbutírico en dosis de 10,00 mg/l) con un promedio
de 2,15 mg/l. Resultado que coincide con Huber &
Oliveira (2010), quienes menciona que el ANA ayuda
a incrementar el volumen de las raíces a baja dosis
(2,75 mg/l).
Tabla 3. Promedios de volumen de raíz mediante la
aplicación de reguladores de crecimiento para la
propagación vegetativa de guayusa
Nº
Tratamientos
Promedios
Volumen de
raíz
1
Ácido Naftalenacético (2,75 mg/l)
4,20 a**1
2
Ácido Naftalenacético (5,50 mg/l)
3,02 a
3
Ácido Indolbutírico (10,00 mg/l)
2,15 b
Promedio
3,12
C.V.(%)
22,25
1Valor(es) señalado(s) con la(s) misma(s) letra(s)
no difieren estadísticamente entre sí (Duncan α
0,05); N.S. No Significativo.** Significancia al 5%.
Porcentaje de acodos enraizados
De acuerdo al análisis de varianza los tratamientos no
presentaron significancias estadísticas, esta variable
alcanzó un promedio general de 81% de acodos
enraizados con un coeficiente de variación de 29,94%
(Tabla 4).
El tratamiento 1 (Ácido Naftalenacético en dosis de
2,75 mg/l) y 2 (Ácido Naftalenacético en dosis de 5,50
mg/l) alcanzaron los mayores promedios de
enraizamiento con 85% cada uno, el tratamiento 3
(Ácido Indolbutírico en dosis de 10,00 mg/l) alcanzó
el menor promedio con 72% (Tabla 4). Resultado que
coinciden con (Nilca et al., 2018) quien, en su
investigación, propagación asexual mediante la
técnica de acodo aéreo, probando ANA AIB, siendo la
dosis de ANA (2,75 y 5,50 mg/l) que reportó los
mejores porcentajes con 87% en relación con AIB
(10,00 mg/l) un promedio de 75%.
Tabla 4. Promedios de porcentaje de acodos
enraizados mediante la aplicación de reguladores de
crecimiento para la propagación vegetativa de guayusa
Nº
Tratamientos
Promedios
Porcentaje
de acodos
enraizados
1
Ácido Naftalenacético (2,75 mg/l)
85 NS
2
Ácido Naftalenacético (5,50 mg/l)
85
3
Ácido Indolbutírico (10,00 mg/l)
72
Promedio
81
C.V.(%)
29,94
1Valor(es) señalado(s) con la(s) misma(s) letra(s) no
difieren estadísticamente entre sí (Duncan α 0,05);
N.S. No Significativo. ** Significancia al 5%.
Conclusiones
En términos generales se observó que la aplicación de
Ácido Naftalenacético en dosis de 2,75 mg/L y 5,50%
se obtuvo mayor promedio de 85% en los dos
tratamientos mientras que con el Ácido Indolbutírico
se logró un 72%.
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El Ácido Naftalenacético en dosis de 2,75 mg/l reportó
el mayor volumen de raíz y longitud con un promedio
de 4,2 mg/l y 7,76 mm respectivamente.
Referencias Bibliográficas
Bernal, B., & Ramos, L. (2019). Determinación del
mapa de zonas de vida por metodología
Holdridge mediante técnicas de sensoramiento
remoto y geoestadística en la vertiente del
Pacífico del Perú.
https://hdl.handle.net/20.500.12672/11551
Crespo, C. (2018). Determinación indirecta del
contenido de cafeína en el cultivo de guayusa
(Ilex guayusa), mediante el ndvl. Quito.
http://www.dspace.uce.edu.ec/handle/25000/14
258
Flores, M. (2019). Evaluación de enraizadores en
estacas de cacao (Theobroma cacao L.) con tres
diferentes cortes de hoja tolerantes a la
monillia en la Estación Experimental Sapecho
Alto Beni.
http://repositorio.umsa.bo/xmlui/handle/123456789/2
0630
Josué, V. (2020). Conservación in situ de plantas
nativas herbáceas, medicinales o
bioplaguícidas, como reservorio de Diversidad
genética y cultural, Mariscal Sucre Guayas.
Universidad Agraria del Ecuador.
https://cia.uagraria.edu.ec
Martine, G. Salinas, B., & Valdivieso, V. (2013).
Proyecto asociativo entre la Fundación Runa y
la empresa kallari, productoras del cacao y de
la planta de guayusa para la producción y
comercialización de un fitofármaco que eleve el
rendimiento mental aplicado a los estudiantes
universitarios de la ciudad. Quito.
http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/58
12
Quispe, M. (2013). Propagación vegetativa de
esquejes de queñua (Polylepis besseri Hieron)
en base a la aplicación de dos enraizadores
naturales y tres tipos de sustratos en el vivero
de la comunidad de Huancané. [Tesis de grado,
Universidad Mayor de San Andrés, La Paz,
Bolivia].
https://repositorio.umsa.bo/bitstream/handle/1
23456789/4136/T-
1887.pdf?sequence=1&isAllowed=y
Radice, V. (2007). Caracterización fitoquímica de la
especie Ilex guayusa Loes. y elaboración de un
prototipo de fitofármaco de interés comercial.
La Granja, 6 (2). 1-9.
https://lagranja.ups.edu.ec/index.php/granja/a
rticle/view/6.2007.01
Ramírez-Villalobos, M., & Urdaneta-Fernández, A.
(2004). Efecto del ácido naftalenacético y de
diferentes sustratos sobre el enraizamiento de
acodos aéreos del guayabo (Psidium guajava
L.). Rev. Fac. Nac. Agron. Medellin, 21(1), 28-
34.https//www.revfacagronluz.org.ve/pdf/suple
mento 2004/ramirez y urdaneta.pdf
Torres, C. (2022). Efecto del ácido indol butírico y
ácido &-naftalenacético en el enraizamiento de
estacas de Smallanthus glabratus (DC.) H.
Rob.“Shita negra”, en invernadero.
https://repositorio.unc.edu.pe/handle/20.500.1
4074/4917